DNA污染/核酸污染清除剂(DNA-ExitusPlus)
快速帮您解决PCR过程中令人头痛的DNA污染问题
特别适用于PCR室分子生物学试验的常规清洁
DNA扩增技术是目前实验室常用的技术之一。但是由于在PCR过程中出现的DNA污染却是令人很头痛的事情,目前主要有2种方法来预防DNA的污染:
1、通过加入DNA酶或者化学方法修饰降解DNA;
2、通过对DNA碱基进行修饰,保证DNA完整性以阻止DNA聚合酶的序列读取;然而经DNA双链断裂分析结果显示,目前市场上的大多数DNA清除试剂均不能完全的降解DNA!针对上述产品的不足,德国AppliChem公司推出了的DNA污染/核酸污染清除试剂DNA-ExitusPlus。该试剂在市面已有产品的基础上做了进一步的改良,能同时对DNA链进行双链断裂和降解。
DNA-ExitusPlus是一种非碱性,没有腐蚀性,没有致癌影响的DNA污染去除溶液。它可以使用在实验室的所有地方。据的一项测试表明,传统商业化的DNA去除剂往往含有有潜在腐蚀性危险的化学成分,包含叠氮化合物、矿物质酸如磷酸、盐酸、刺激性强的过氧化物,碱性物质如氢氧化钠等。德国AppliChem公司的DNA-ExitusPlus则表现,没有对金属板产生任何损伤。对实验室其他类型的仪器表面也进行了腐蚀性检测,DNA-ExitusPlus不会对塑料、橡胶等仪器的表面产生任何损伤。
1、DNA-ExitusPlus DNA污染清除剂特点:
A、可去除实验室仪器及操作场所表面DNA和RNA的污染;
B、可清洁实验室内PCR工作场所和仪器装置,防止假性扩增;
C、可用于清洁电泳设备、移液器、离心管、离心柱等装置;
D、简单,试剂以可反复使用的喷雾装置存放并喷洒使用;
E、快捷,只需10分钟,喷洒后擦拭后即可;
F、高效,采用接触催化及协同作用非酶性降解DNA和RNA;
G、安全,所有的组分均可降解,不会残留在表面对人体和机器造成伤害;
H、无毒,不含有腐蚀性的酸碱物质。
2、DNA-ExitusPlus DNA污染清除剂使用方法:
清理实验室台面:直接喷洒,反应10-15分钟后,用无菌水湿纸擦拭后风干即可,无需用无菌水冲洗;
清理实验室器材:浸湿纸巾后擦拭仪器设备表面,再用干净的纸巾擦干;对于小型器材设备,直接浸润后擦干;
清理塑料玻璃设备:通过涡旋将试剂覆盖到完整设备表面,无菌水冲洗后风干;
清理移液器:按说明拆卸移液器后将轴浸润到试剂1分钟,无菌水冲洗后风干。
值得注意的DNA污染清除试新的配方成功减少了指示剂和低浓度的酒精。在试剂的组分中减少酒精的含量,可以很好的改善其活力。
3、DNA-ExitusPlus DNA污染清除剂使用效果验证:
该试剂在已有产品的基础上做了进一步的改良,DNA-ExitusPlus能同时对DNA链进行双链断裂和降解。其DNA清除效果非常明显,当合适的应用于工作区域时,能完全的消除由于非目标DNA导致的扩增。图一C为未处理对照,X1-X4为传统商业化DNA清除试剂,D、D+与D+(10min)为DNA-ExitusPlus系列DNA清除试剂。
图二为传统DNA去污剂与DNA-ExitusPlus的潜在腐蚀能力的实验对照。我们选择金属盘做实验,因为它是实验材料和仪器的常用材料。将试剂分为10ul等份分别放在不同的金属盘表面。以无菌水(0)为对照,经过20分钟孵育,将金属盘擦拭干净并用无菌水清洗,经完全的清洗后拍照。X2,X3 和 D为传统DAN去污剂在不同金属盘表面引起的腐蚀与损伤,而用经DNA- ExitusPlus(D+)处理的金属盘的表面没有任何损伤。DNA-ExitusPlus可以在抗腐蚀试验中显现出它的特性,在所有的金属表面的后期处理中没有损害,没有腐蚀。在其他塑料制品上做实验,依旧没有任何腐蚀。这种试剂可稳定储存12个月并且是耐热的。
用DNA-ExitusPlus去除DNA污染的在PCR试验中,将重量为0.1 到1ng的测试DNA的冻干粉放在PCR试管中,在放有冻干DNA样本中分别加入无菌水和DNAExitusPlus,此后再用100ul的无菌水将PCR管清洗两次(见图三)。在PCR反应中,将50ul的混合液加入以上管子,反应的混合物包含的引物,可使对照DNA和测试DNA扩增。对照DNA(1ng)加入到样本中证明PCR反应没有被抑制住。扩增得到的DNA带与所测试DNA是相符的,表明了DNA分子的模板依旧是完整的。在完全降解和去除测试DNA以后,PCR反应没有扩增这条模板任何的片段。阴性对照为加入无菌水的测试DNA模板和对照模板,跑胶后观察发现,在经过DNA-ExitusPlus处理以后的PCR反应,只是扩增出了对照DNA的片段。这表明,DNA- ExitusPlus可清除所有测试DNA模板的痕迹。
DNA污染清除剂